差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細胞器是不穩定的,需要低溫高速離心,常用的是差速離心法。通過離心后倒出上清液和沉淀分開,把分離出來的上清液再增大轉速離心,分離出第二部分沉淀,這樣不斷增大轉速,逐比較分離出所需要的物質。利用這種方法可以有效地分離大小上差別較大的顆粒,但不能分離大小相似的顆粒,而且所分離出來的組分往往是不均一的,雜有其他種類的顆粒。
全自動控溫離心機如何確定分離轉速和分離時間:
1、樣品成分:粘附性小的樣品容易沉降分離,粘附性強的樣品不易沉降分離。
2、樣品各組分的比重差:樣品各組分的比重差大,容易沉降分離。各組分的比重差小,不易沉降分離。
3、顆粒大?。捍箢w粒容易沉降分離,小顆粒不易沉降分離。
4、粘度:樣品中液體粘度小,容易沉降分離。液體粘度大,不易沉降分離。
5、分離要求:分離要求高,可選擇較高的分離轉速和較長的分離時間。
一般而言,樣品的粘附性小、各組分的比重差大、顆粒大、液體粘度小,可選擇分離轉速低些、分離時間短些。
全自動控溫離心機分離技術是根據顆粒在一個實用離心場合中的狀態而發展起來的新技術。不同密度,大小或形狀的顆粒在不同的離心場合中沉降,所以一個大體是球形非均一的混合物,可以用離心的方法加以分離,離心機是為了進一步研究生物化學,分離大量的物質。例如收集細胞,分離血漿,從這些預純化的制劑中分離DNA和蛋白質分子,并可分離出病毒以及大規模大腸桿菌,嚴細胞成分,核蛋白微粒等。
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